液氮速凍處理對(duì)樣本保存的影響

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1.液氮速凍處理對(duì)樣本保存的影響 液氮速凍處理的10頭亞洲小車蝗樣本在12h內(nèi)均無(wú)存活跡象。說(shuō)明通過(guò)液氮速凍處理能夠使亞洲小車蝗活體樣本迅速死亡，從而消除因逆境脅迫造成的樣本本身生理生化變化，避免了這些變化對(duì)蝗蟲(chóng)樣本基因組DNA提取產(chǎn)生可能的不利影響。

2.不同保存方法對(duì)基因組 DNA提取影響亞洲小車蝗經(jīng)基因組DNA提取后，用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖1～3。由圖可見(jiàn)，液氮速凍后保存和無(wú)水乙醇保存的樣本提取的基因組DNA電泳條帶清晰、無(wú)拖尾且亮度高，說(shuō)明得到的DNA濃度較大；直接冷凍保存的樣本提取的DNA電泳檢測(cè)結(jié)果顯示條帶整齊、無(wú)拖尾，但是亮度較低，說(shuō)明得到的DNA濃度較小；蝗蟲(chóng)干標(biāo)本提取的基因組DNA電泳檢測(cè)顯示條帶不清楚，并有明顯拖尾現(xiàn)象，有的甚至看不到條帶，說(shuō)明干制標(biāo)本保存會(huì)導(dǎo)致蝗蟲(chóng)基因組DNA發(fā)生嚴(yán)重降解，會(huì)對(duì)下一步基因擴(kuò)增、分子標(biāo)記等分子生物學(xué)試驗(yàn)的進(jìn)行造成不利的影響。

3.冷凍脅迫對(duì)基因組DNA提取影響對(duì)比液氮速凍后保存和直接冷凍保存兩種樣本保存方法對(duì)蝗蟲(chóng)基因組DNA提取結(jié)果可以看出，液氮速凍后保存的樣本提取的基因組DNA明顯比直接冷凍保存的樣本基因組DNA的電泳條帶亮度高，說(shuō)明液氮速凍后保存得到的DNA的濃度較大。由此得出，樣本在受到冷凍脅迫死亡的過(guò)程中會(huì)發(fā)生基因組DNA降解現(xiàn)象，使提取得到的DNA 的濃度較小。所以，液氮速凍后保存更適合昆蟲(chóng)基因組學(xué)的研究。